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雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒?操作過(guò)程

更新時(shí)間:2021-12-01點(diǎn)擊次數(shù):1250

雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒操作過(guò)程:

一、粗酶液提?。?/p>

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即粗酶液。2.血清或培養(yǎng)液:直接測(cè)定。 3.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

二、測(cè)定操作: 1.分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到680nm,蒸餾水調(diào)零。2.試劑二、試劑三和試劑四置于30℃水浴保溫30min。 3.對(duì)照管:取一支EP管,加入100μL粗酶液,200μL試劑二,混勻后置于30℃水浴保溫10min;加入200μL試劑三,混勻后8000g,4℃離心10min;取200μL上清液,加入新的EP管,再加入1000μL試劑四,200μL試劑五,混勻后置于30℃水浴保溫20min,于680nm測(cè)定光吸收,記為A對(duì)照管。 4.測(cè)定管:取一支EP管,加入100μL粗酶液,200μL試劑三,混勻后置于30℃水浴保溫10min;加入200μL試劑二,混勻后8000g,4℃離心10min;取200μL上清液,加入新的EP管,再加入1000μL試劑四,200μL試劑五,混勻后置于30℃水浴保溫20min,于680nm測(cè)定光吸收,記為A測(cè)定管。(注意與空白管不同,先加試劑三,后加試劑二) 5.空白管:取EP管,加入200μL蒸餾水,1000μL試劑四,200μL試劑五,混勻后置于30℃水浴保溫20min,于680nm測(cè)定光吸收,記為A空白管。 6.標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入200μL標(biāo)準(zhǔn)品,1000μL試劑四,200μL試劑五,混勻后置于30℃水浴保溫20min,于680nm測(cè)定光吸收,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。

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TEL:021-61210612

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